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技術(shù)文章

Technical articles

2014
10-11

正確選擇您所需要的細胞培養(yǎng)板
一、細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗目的而定。平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇：1）貼壁細胞一般用平底培養(yǎng)板2)懸浮型細胞的培養(yǎng)一般用V型3）U型培養(yǎng)板亦多用于培養(yǎng)懸浮型細胞大部分細胞培養(yǎng)都用平底培養(yǎng)板，便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致，還便于MTT檢測。圓底培...
2014
10-9

本周探討--細胞培養(yǎng)失敗的主要原因？？？
消毒和滅菌微生物污染是造成細胞培養(yǎng)失敗的主要原因（一）物理消毒法1.紫外線消毒:紫外線是一種低能量的電磁輻射，可殺死多種微生物。革蘭陰性菌zui為敏感，其次是陽性菌，再次為芽孢，真菌孢子的抵抗力zui強。紫外線的直接作用是通過破壞微生物的核酸及蛋白質(zhì)等而使其滅活，間接作用是通過紫外線照射產(chǎn)生的臭氧殺死微生物。直接照射培養(yǎng)室消毒，用法簡單，效果好。紫外燈的消毒效果同紫外燈的輻射強度和照射劑量呈正相關，輻射強度隨燈距離增加而降低，照射劑量和照射時間呈正比。因此紫外燈同被照射物的距...
2014
9-25

小牛血清使用注意事項以及正確的凍存方法
使用小牛血清時的注意事項具體如下：1.供血的新生小牛必須是健康牛的產(chǎn)仔，并在產(chǎn)后24小時內(nèi)抽血，此期間不得吸取母乳。2.以無菌操作自頸動脈放血，并在無菌條件下分離血清及濾菌，全過程在36小時內(nèi)完成。經(jīng)濾菌的血清登一20IC保存。3.血清使用前需做細蔭、支原體培養(yǎng)及內(nèi)毒素測定，在確實無污染的情況下方可使用。4.每批小牛血清測定總蛋白含量并分別配成10%,20%,25%于墓礎培養(yǎng)墓和HAT培養(yǎng)墓中，對骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞進行培養(yǎng)，觀察小牛血清對瘤細胞和融合細胞的細胞毒性。若在2...
2014
9-23

根據(jù)歷史起源來談“植物組織培養(yǎng)應用前景”
19世紀30年代，德國植物學施萊登和德國動物學家施旺創(chuàng)立了細胞學說，根據(jù)這一學說，如果給細胞提供和生物體內(nèi)一樣的條件，每個細胞都應該能夠獨立生活；1902年，德國植物學家哈伯蘭特細胞性的理論是植物組培的理論基礎。1958年，一個振奮人心的消息從美國傳向世界各地，美國植物學家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜的嫩皮的細胞進行培養(yǎng)，終于得到了完整植株，并且這一植株能夠開花結(jié)果，證實了哈伯蘭特在五十多年前關于細胞的預言。植物組培的簡單過程如下：剪接植物器官或組織——經(jīng)過脫分化（也叫去分化）形成...
2014
9-23

根據(jù)歷史起源來談“植物組織培養(yǎng)應用前景
19世紀30年代，德國植物學施萊登和德國動物學家施旺創(chuàng)立了細胞學說，根據(jù)這一學說，如果給細胞提供和生物體內(nèi)一樣的條件，每個細胞都應該能夠獨立生活；1902年，德國植物學家哈伯蘭特細胞性的理論是植物組培的理論基礎。1958年，一個振奮人心的消息從美國傳向世界各地，美國植物學家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜的嫩皮的細胞進行培養(yǎng)，終于得到了完整植株，并且這一植株能夠開花結(jié)果，證實了哈伯蘭特在五十多年前關于細胞的預言。植物組培的簡單過程如下：剪接植物器官或組織——經(jīng)過脫分化（也叫去分化）形成...
2014
9-16

ELISA法細胞凋亡檢測操作步驟
細胞凋亡的發(fā)生是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產(chǎn)生180bp～200bp或其倍數(shù)的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內(nèi)切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法，應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體，與核小體片段形成夾心結(jié)構(gòu)，可特異性檢測細胞溶解物中的核小體片段。常見樣本以及基本操作方法：1.收集細胞，離心后，用200µl溶細胞緩沖液重新懸浮，室溫下作用30min。（培養(yǎng)細胞的上清液、血漿和血清都可作為檢測樣...
2014
9-9

大鼠胰島素ELISA試劑盒相關介紹
胰島素是由胰島B細胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質(zhì)激素。胰島素是機體內(nèi)*降低血糖的激素，同時促進糖原、脂肪、蛋白質(zhì)合成。大鼠胰島素ELISA試劑盒是一種酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠胰島素（INS）水平。用純化的大鼠胰島素（INS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素（INS），再與HRP標記的胰島素（INS）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯...
2014
9-3

探討“ELISA實驗重復性不佳及出現(xiàn)白板、陽性對照不顯色”
（一）、重復性不佳可能原因及解決方法？1.樣品數(shù)量多少不一，加樣時間有長有短。重復某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近2.保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致。重復測定標本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性。3.加樣量不一致。樣本稀釋前應充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。。（二）出現(xiàn)白板，陽性對照不顯色可能原因及解決方法？1.顯色液變質(zhì)更換新的顯色液2.洗滌液配置有誤請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制。3.未加酶結(jié)合物而認為...

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